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第二节 白芍药材和饮片研究
一、药材来源
本品为毛茛科植物芍药 Paeonia lactiflora Pall.的干燥根。夏、秋二季采挖,洗净,除去头尾及细根,置沸水中煮后除去外皮或去皮后再煮,晒干。
本研究共收集了31份药材(BS-YC-01~BS-YC-31),采自主产区、道地产区,经广东一方制药有限公司魏梅主任中药师鉴定,研究样品均为《中国药典》2015年版一部“白芍”项下规定的品种。
二、饮片炮制
照《中国药典》2015年版一部“白芍”饮片项目下进行炮制,取白芍原药材,洗净,润透,切薄片,干燥,即得白芍饮片(BS-YP-01~BS-YP-31)。
三、药材及饮片质量标准
(一)性状
白芍药材呈圆柱形,平直或稍弯曲,两端平截,长5~18cm,直径1~2.5cm。表面类白色或淡棕红色,光洁或有纵皱纹及细根痕,偶有残存的棕褐色外皮。质坚实,不易折断,断面较平坦,类白色或微带棕红色,形成层环明显,射线放射状。气微,味微苦、酸。
白芍饮片呈类圆形的薄片。表面淡红棕色或类白色,平滑。切面类白色或微带棕红色,形成层环明显,可见稍隆起的筋脉纹呈放射状排列。气微,味微苦、酸。见图10-2-1。
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图10-2-1 白芍饮片图
(二)检测
按照《中国药典》2015年版一部“白芍”项下有关要求,对上述白芍药材及饮片进行检测,所有样品均符合规定,测定结果见表10-2-1、表10-2-2。
表10-2-1 白芍药材测定结果
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续表
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表10-2-2 白芍饮片测定结果
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续表
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(三)特征图谱
1.色谱条件
以 InterSustain C 18(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱;以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,按表10-2-3规定进行梯度洗脱;流速为每分钟1.0ml;柱温为30℃;检测波长为230nm;进样量为10μl。理论板数按芍药苷峰计算应不低于2 000。
表10-2-3 梯度洗脱表
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2.参照物溶液制备
取没食子酸对照品、儿茶素对照品、芍药内酯苷对照品、芍药苷对照品、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖对照品、苯甲酰芍药苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每 1ml含没食子酸 50μg、儿茶素 30μg、芍药内酯苷 100μg、芍药苷 160μg、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷30μg的混合溶液,摇匀,即得。
3.供试品溶液制备
取本品中粉约0.4g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇50ml,称定重量,超声处理(功率250W,频率40kHz)30分钟,放冷,用稀乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
4.方法学验证
方法学考察合格(具体内容略)。
5.特征图谱的建立及共有峰的标定
(1)药材特征图谱的建立及共有峰的标定:
按白芍药材及饮片特征图谱研究方法,分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
供试品色谱中应呈现6个特征峰(图10-2-2、图10-2-3),其中3个峰应分别与相应参照物峰保留时间相同(表10-2-4);与芍药苷参照物峰相应的峰为S峰,计算各特征峰与S峰的相对保留时间,其相对保留时间应该在规定值的±10%范围之内,规定值为:0.90(峰3)、1.59(峰 5)、2.21(峰 6)。
(2)饮片特征图谱的建立及共有峰的标定:
按白芍药材及饮片特征图谱研究方法,分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得(图10-2-4、图10-2-5)。
以芍药苷峰为参照峰,计算相对保留时间(表10-2-5)。
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图10-2-2 白芍药材特征图谱共有峰
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图10-2-3 白芍药材对照特征图谱
峰1:没食子酸;峰2:儿茶素;峰3:芍药内酯苷;峰4(S):芍药苷;
峰 5 :1,2,3,4,6- 五没食子酰葡萄糖;峰 6 :苯甲酰芍药苷
色谱仪:Waters e2695 高效液相色谱仪;色谱柱:InterSustain C 18
表10-2-4 白芍药材特征图谱相对保留时间
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续表
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图10-2-4 白芍饮片特征图谱共有峰
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图10-2-5 白芍饮片对照特征图谱
峰 1 :没食子酸;峰 2 :儿茶素;峰 4(S):芍药苷;
峰 5 :1,2,3,4,6- 五没食子酰葡萄糖;峰 6 :苯甲酰芍药苷
表10-2-5 白芍饮片特征图谱(相对保留时间)
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续表
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本研究在白芍标准汤剂质量指标和《中国药典》2015年版白芍质量标准的基础上,对采集的31批白芍药材和饮片的来源、性状、鉴别、检查、浸出物、含量测定等项目进行质量分析,31批白芍药材与饮片均符合《中国药典》2015年版相关规定。同时根据白芍标准汤剂的研究情况,在白芍药材、饮片中增加特征图谱研究,以建立符合白芍标准汤剂质量指标、且高于中国药典标准的白芍药材、饮片企业内控标准,为白芍配方颗粒提供质量安全、优等、稳定的原料。通过对31白芍药材、饮片、标准汤剂特征图谱的研究,在白芍药材、饮片特征图谱中规定白芍药材、饮片应具有6个特征峰及其相应的保留时间范围,指认了峰1为没食子酸,峰2为儿茶素,峰3为芍药内酯苷,峰4为芍药苷,峰5为1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖,峰6为苯甲酰芍药苷。