【例题解析】

例1.在DNA和RNA中，G、C各代表什么？

解析：本题主要考查脱氧核糖核酸与核糖核酸中核糖的区别，需掌握核酸的基本机构。

在DNA中，G代表鸟嘌呤脱氧核苷酸，C代表胞嘧啶脱氧核苷酸。而在RNA中，G代表鸟嘌呤核苷酸，C代表胞嘧啶核苷酸。

例2.影响DNA的T_m值的因素有哪些？

解析：本题主要考查T_m值的定义及其影响因素。通常把DNA的双螺旋结构热变性过程中紫外吸收值达到最大值的1/2时的温度称为解链温度或熔解温度（melting temperature，T_m）

（1）DNA的均一性，均质DNA的熔解过程在一个较小的温度范围，异质DNA熔解过程发生在一个较宽的温度范围。

（2）G-C之含量，在一定浓度的介质中，T_m值与G-C含量有正比关系。

（3）介质中的离子强度，一般说离子强度较低的介质中T_m值低，且熔解温度范围宽。

例3. DNA的主要理化学性质及其应用。

解析：本题考查的是DNA基本的理化性质，要能在理解的基础上灵活应用，尤其在核酸实验技术方面。

（1）溶解性　DNA能溶于水，不溶于有机溶剂，所以可用无水乙醇将其沉淀下来。

（2）黏性和刚性　DNA分子很长，溶液呈黏性。但是其双螺旋结构具有一定的刚性，易受剪切力的影响，故提取纯化时应小心操作。

（3）水解　DNA的糖苷键和磷酸二酯键可被酸、碱和酶水解，产生碱基、核苷、核苷酸和寡核苷酸。酸水解时，糖苷键比磷酸酯键易于水解；嘌呤碱的糖苷键比嘧啶碱的糖苷键易于水解；嘌呤碱与脱氧核糖的糖苷键最不稳定。DNA对碱比较稳定。细胞内有各种脱氧核糖核酸酶可以分解核酸，其中限制性内切酶是基因工程的重要工具酶。

（4）酸碱性质　DNA的碱基和磷酸基均能解离，因此核酸具有酸碱性。碱基杂环中的氮具有结合和释放质子的能力。核苷和核苷酸的碱基与游离碱基的解离性质相近，它们是兼性离子。

（5）紫外吸收　DNA的碱基具有共轭双键，因而有紫外吸收的性质。各种碱基、核苷和核苷酸的吸收光谱略有区别。核酸的紫外吸收峰在260nm附近，可用于测定核酸。根据260nm与280nm的吸收光度（A₂₆₀）可判断核酸纯度。

（6）变性、复性与杂交　变性作用是核酸双螺旋结构被破坏，碱基对之间的氢键断裂，双链解开，但共价键并未断裂成为两条单链的DNA分子。引起变性的因素很多，升高温度、过酸、过碱、纯水以及加入变性剂等都能造成核酸变性。核酸变性时，物理化学性质将发生改变，表现出增色效应。热变性一半时的温度为T_m值，DNA的G+C含量影响T_m值。根据经验公式X_G+C=（T_m-69.3）×2.44可以由DNA的T_m值计算G+C含量，或由G+C含量计算T_m值。

变性DNA在适当条件下可以复性，物化性质得到恢复，具有减色效应。用不同来源的DNA进行退火，可得到杂交分子。也可以由DNA链与互补RNA链得到杂交分子。杂交的程度依赖于序列同源性。分子杂交是用于研究和分离特殊基因和RNA的重要分子生物学技术。

例4.与DNA变性、复性这一性质有关的分子生物学技术有哪些？

解析：该题考查的是实验基本理论方面的内容，要对常用的核酸技术有一定的了解。这些技术包括：聚合酶链式反应（PCR）、核酸杂交技术（Southern blot，Northern blot及Dot blot）和DNA测序技术等。